Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедурыРады сообщить, что мы теперь располагаем собственным кабинетом лабораторной диагностики. Хорошая диагностика по нынешним стандартам подразумевает наличие современного оборудования. Наша лаборатория оснащена автоматическими гематологическим и биохимическим анализаторами, анализатором мочи, электоронным микроскопом. Лабораторная диагностика стала неотъемлемой частью современной ветеринарной медицины. При ее помощи врач может получить важную информацию, помогающую наиболее точно поставить диагноз, определить стадию заболевания и назначить в короткие сроки правильное лечение.

ul

Биохимические исследования крови животных

Важнейший метод диагностики патологических состояний животного. Исследование сыворотки крови дает возможность оценить активность тех или иных ферментов в организме, тем самым давая возможность оценить не только какие органы поражены, но и оценить тяжесть патологического состояния.

Кроме ферментов при проведении биохимии крови исследуется количество субстратов и жиров, а также электролитов (микроэлементов, растворенных в плазме крови) сыворотки. Для проведения диагностики берется венозная кровь в специальную пробирку, применение которой дает возможность «отбить» сыворотку крови.

Кровь берется натощак! И обязательно ДО проведения каких-либо лечебных процедур.Исследования проводятся на современном автоматическом биохимическом анализаторе крови.

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Бабезии в эритроцитах собаки

ul

Исследование кожи на паразитарные и грибковые заболевания

Для диагностики паразитарных поражений кожи и дерматофитозов у нас применяются следующие методы: трихоскопия (микроскопия шерсти), мазок-отпечаток на липкую ленту и на предметное стекло с микроскопией окрашенного препарата, глубокий соскоб. Для более точной оценки пораженный участок 2 дня не обрабатывать спреями, мазями и тд. Также проводим цитологическое исследование мазков с уха при непроходящих отитах, микроскопию содержимого слухового прохода на отодектоз.

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Споры дерматофитов (лишай)

ul

Гистологические исследования

Исследование тончайших срезов тканей пораженных новообразованиями органов. Исследуют удаленный при оперативном вмешательстве орган или орган, взятый посмертно, помещенный в 10% раствор формалина. Срезы производят на специальном оборудовании в ветеринарной лаборатории, окрашивают, типизируют вид новообразования.

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Липома

ul

Общий клинический анализ кала (ОКА кала)

С помощью этого анализа можно оценить:

  • ферментативную активность и переваривающую способность желудка и кишечника;
  • характер и интенсивность микробной деятельности (дисбактериоз);
  • наличие воспалительного процесса;
  • эвакуаторную функцию желудка и кишечника (как работает ЖКТ);
  • наличие гельминтов, простейших и их яиц (цист)

Оценивается кислотность, цвет, запах кала, его консистенция, наличие специфичных для кала химических соединений и крови.Для проведения анализа кала его собирают в одноразовую специальную лабораторную пластиковую посуду.

Для исследования кала на яйцеглист можно использовать суточный кал и убрать его в холодильник. Для исследования на цисты лямблий кал должен быть свежий 20 мин после дефекации.

Нельзя направлять для исследования кал, взятый после клизьмирования, а также кал, собранный после проведения диагностических рентгенологических исследований с рентгеноконтрастными веществами.

ul

Исследования на инфекционные заболевания методами ПЦР и ИФА

Наиболее прогрессивным на сегодняшний день методом диагностики инфекционных заболеваний у животных является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Данный метод позволяет определить возбудителя (его фрагментов) даже в сверхмалом количестве патматериала.

Исследования методом ПЦР наиболее надежны на сегодняшний день, они дают максимально достоверные результаты исследования в довольно короткие сроки. Срок выполнения анализа на инфекционные заболевания методом ПЦР – от 1 до 3 суток.

Перечень инфекций для диагностики методами ПЦР и ИФА, а также цены можно уточнить по телефону 232-97-70.

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Парааскаридоз

ul

Цена за стандартные анализы

Наиболее распространенным и точным способом выявления наличия ВИЧ инфекции в организме человека остается иммуноферментный анализ (ИФА) и метод иммунного блоттинга. На данный момент это «золотой стандарт» диагностики заболевания уже на раннем этапе его развития.

Подобное тестирование проводится на базе как коммерческих лабораторий, так и государственных медицинских учреждений. В зависимости от того, где именно человек желает сдать кровь, будет отличаться стоимость анализа на ВИЧ.

На данный момент средняя стоимость проведения ИФА для выявления антител к протеинам вируса иммунодефицита составляет 600-650 рублей. Наиболее часто в эту сумму входят:

  • Услуги лаборантов.
  • Цена реактивов.
  • Сама процедура забора крови.

Когда есть необходимость проведения экспресс диагностики подобным способом, то стоимость возрастет еще примерно на 50% рублей. Однако данная стоимость актуальна для частных лабораторий. Они работают на собственном финансировании и соответственно требуют оплаты своих услуг из кармана клиентов.

Если говорить про государственные учреждения, то согласно действующему законодательству, стоимость анализа на ВИЧ для граждан Российской Федерации – ноль рублей, ноль копеек.

Чтобы сдать кровь бесплатно, следует просто обратиться к терапевту или инфекционисту в поликлинике по месту жительства (или временного пребывания). С собой нужно иметь паспорт гражданина РФ или документ, заменяющий его.

При желании сдачи анонимного анализа можно обойтись и без подтверждения личности.

ul

Сущность нового молекулярного метода

Посредством метода пцр стараются добиться увеличения незначительной концентрации некоторых сегментов нуклеиновой кислоты из отобранной порции био материала (или пробы). Основой исследования является избирательное многоразовое копирование (амплификация) отрезка ДНК посредством ферментов в условиях медицинской лаборатории.

Открытие полимеразной цепной реакции принадлежит Кэри Мюлису (83 г), благодаря чему химик заработал благодарность в виде Нобелевской премии (93 г).

В ходе исследования био материала методом пцр применяют особую установку — амплификатор. В современном оборудовании предусмотрена возможность установления специальной настройки для нагревания и остуживания пробирок во избежание появления ошибочных данных диагностики.

В ходе проведения исследования последовательно сменяют три стадии — денатурацию, отжиг, элонгацию. При этом каждая включает 25-30 повторов.

Достоинства инновационной диагностики

Проведение диагностики на выявление инфекционных заболеваний по методу пцр достаточно востребовано в современном обществе. Плюсами такого обследования является:

  1. Поиск возбудителя инфекции в изъятой и приумноженной порции материала. Результат обследования позволяет увидеть наличие или отсутствие РНК/ДНК возбудителя заболевания.
  2. Почти исключаются ложные и не точные реакции.
  3. Метод пцр является высокочувствительным. Иными словами данный анализ позволяет увидеть даже клетки возбудителя инфекции, находящиеся в единственном числе.
  4. Результат на латентную форму возбудителя бывает готов спустя 4 ч с момента проведения обследования.

Можно определить инфекционных возбудителей и без наличествующей симптоматики заболевания. Кроме этого пцр анализ проводят и по выздоровлении после перенесенного инфекционного либо вирусного заболевания.

  Норма сахара в крови: критерии, определение и коррекция

Сейчас методы пцр диагностики развиваются быстрыми темпами, находясь в постоянном усовершенствовании. Возникают некоторые подвиды обследования.

Основа медицинской методики

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедурыАнализ пцр предназначен для проведения исключительно в стенах лаборатории. Чтобы выполнить его условия, требуется увеличить в несколько раз строение РНК/ДНК человека. При этом должно образоваться столько РНК/ДНК, сколько требуется для проведения визуальной оценки.

Во время процедуры создается копия отрезка РНК/ДНК, отбираемого по заданным условиям. Для этого ведется целая база данных, по которой сличают строение разных инфекционных составляющих. ПЦР анализ позволяет не только распознать возбудителя, но и провести его количественную оценку.

Области применения методики

Данный вид диагностики используется разными областями медицины:

  •  с его помощью можно проводить обследования на предмет идентификации генетического материала человека — волос, крови или слюны;
  •  взятие крови для пцр анализа бывает необходимо в случае генотипирования (к примеру, для выяснения индивидуальной генетической реакции на лекарство);
  •  метод помогает установить родственные зависимости человека, то есть определить его корни;
  •  наибольшую распространенность метод молекулярной ДНК и РНК диагностики получил в медицине для установления факта разных инфекционных патологий.

ul

Подготовка перед анализом — залог безошибочной оценки био материала

Чтобы пцр анализ показал достоверный результат, необходимо правильно подготовиться к процедуре забора био материала. Важно придерживаться следующих рекомендаций:

  1. Если необходимо сдать слюну, то от приема лекарств и гастрономических продуктов стоит воздержаться минимум за 4 часа до взятия материала. Результат будет точным, если перед взятием соскоба с внутренней поверхности щеки рот предварительно прополоскать чистой водой и выполнить легкие массирующие движения на коже, способствующие обильному слюноотделению.
  2. Назначение урогенитального мазка у любого человека (и у мужчин и у женщин) предполагает соблюдение полового покоя на протяжении 3-х суток. За неделю до похода в лабораторию нельзя пользоваться любыми средствами интимной гигиены (свечами, гелями, мазями, кремами), спринцеваться. За пару недель необходимо исключить прием антибиотиков. У женщин в период менструации мазок не берут, это становится возможным лишь по прошествии 3 суток после остановки менструального кровотечения. Примерно за 3 ч до забора материала должен отмечаться последний эпизод мочеиспускания.
  3. Сбор мочи можно выполнить предварительно дома. Перед этим проводят основательную гигиеническую очистку наружных половых органов. Уже после этого порцию мочи в объеме 50-60 мл собирают в специальный пластиковый контейнер. Женщинам запрещено сдавать мочу во время менструации. Важно следить за качеством и чистотой собираемого материала. Для чего мужчинам рекомендуется оттягивать кожную складку, а женщинам закрывать влагалище обычным гигиеническим тампоном.
  4. Сдача спермы у мужчин предполагает половой покой на протяжении 3 суток. Кроме того медики настоятельно не рекомендуют в это время принимать процедуры, сопровождающиеся воздействием на тело высоких температур (будь то ванна с горячей водой или посещение сауны), употреблять спиртные напитки и кушать острые блюда.

Воздержаться от мочеиспускания придется также на протяжении 3 часов до процедуры.

ul

  • Расшифровка показателей
  •   Что такое холестерин и зачем он нужен в нашем организме? Норма холестерина в крови
  • Интерпретирует получившийся результат доктор, направивший на обследование.
  • Взять на руки бланк с анализом можно уже на следующий день, и в нем может быть отражено одно из двух возможных заключений:
  •  отрицательный результат — является показателем того, что искомый возбудитель инфекции в изучаемой пробе не выявлен;
  •  положительный результат — позволяет дать подтверждение, что у человека имеется РНК/ДНК возбудителя инфекции в организме.

При этом вполне допускается ситуация, когда при отсутствии внешних проявлений заболевания результат оказывается положительным. Такое возможно обычно либо в самом начале развития заболевания, либо при обыкновенном носительстве возбудителя инфекции. Если выявлено второе, то проведение лечебных мероприятий планируют не всегда. Ограничиваются тем, что предписывают регулярно посещать профильного специалиста. Например, это бывает в ситуации наличия инфекционных возбудителей:

  •  папилломавируса;
  •  герпеса, пр.

Нередко их находят в мазке из уретры, цервикса или в слюне.

При этом важно понимать, что риск заражения здорового человека инфекционным носителем имеется достаточно высокий, даже если болезнь не доставляет последнему неудобства. Необходимость проведения лечебной терапии и ее интенсивность в случае с положительным результатом определяет лечащий врач.

Расшифровка анализа пцр содержит и количественные характеристики. Ориентируясь на количественные показатели доктор определяет степень активности патологического процесса, корректирует стадию развития болезни. На основе аналитических данных из результата специалист ведет подборку лечебного препарата и определяется с нужной дозировкой лекарства.

Читайте также:  Ингалянты: что это, признаки употребления, последствия, зависимость и лечение

ul

Обследование на скрытые патологии

При подозрении у человека на наличие ИППП ему предписывают обследоваться, для чего нужно сдать кровь на скрытые инфекции. Принимать скрытую (латентную) форму могут следующие возбудители:

  • уреаплазмы;
  • хламидии;
  • гонококки;
  • гарднереллы;
  • микоплазмы и пр.

Обнаружению латентного характера заболевания ППП способствует популярный ныне комплексный анализ пцр 12. Для выполнения диагностики делают забор мазка из половых путей. Результаты бывают готовыми спустя 2 суток.

ul

Источник: https://dermalatlas.ru/razdely-meditsiny/kardiologiya/polimeraznaya-tsepnaya-reaktsiya-metod-tsena-diagnostika-provedenie-protsedury/

Пцр диагностика (анализ): цена в москве

Анализ на ПЦР помогает со 100-процентной точностью выявить любого возбудителя инфекции даже при его минимальном содержании в тканях. Принцип исследования основан на исследовании генетического материала патогенных микроорганизмов.

ПЦР-диагностика проводится в условиях современной лаборатории в течение нескольких часов. Результаты анализов автоматически высылаются на электронную почту пациента уже на следующий день.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) построен на принципах молекулярной биологии и относится к области генетических исследований.

Любой живой организм содержит в своей структуры молекулы нуклеиновых кислот – ДНК и РНК. Это своеобразный генетический паспорт, который помогает определить, к какому виду относится тот или иной его «предъявитель».

Однако чтобы просканировать этот «паспорт», до недавнего времени требовался определенный минимальный объем биологического материала. Если концентрация ДНК была ниже необходимой, диагностический анализ был невозможен.

При диагностике методом ПЦР образец биологического материала обрабатывают специальными ферментами (полимеразами), которые позволяют запустить процесс многократного копирования имеющейся ДНК (РНК).

Используя каскад цепной реакции, по принципу геометрической прогрессии всего за несколько часов можно из одной молекулы нуклеиновой кислоты получить несколько десятков триллионов копий.

Такого объема более чем достаточно для проведения любых сравнительных исследований.

Для анализа используют амплификатор, в котором при соблюдении строгого температурного режима происходит процесс многократной репликации ДНК. Обычно достаточно 20-30 циклов репликации. Каждый их них включает 3 последовательных этапа:

  • денатурация — нагрев ДНК-матрицы до 96°C с разрушением водородных связей между соседними цепочками;
  • отжиг — понижение температуры на 4°C для создания репликативной вилки;
  • элонгация — запуск в работу ДНК-полимераз для синтеза новых нуклеотидных цепочек на основе материнской.

Каждый трехэтапный цикл длится в среднем 15-20 минут.

Преимущества ПЦР-диагностики

Анализ методом ПЦР высокотехнологичен и требует профессионализма от сотрудников лаборатории, но для современной медицины он стал источником беспрецедентных возможностей в области точной диагностики.

Преимущества ПЦР:

  • универсальность (исследованию  можно подвергать любой биологический материал – от клеток крови, слюны и волос до подозрительных пятен на месте преступления);
  • высокий порог чувствительности (метод способен дать результат при наличии в образце единичных клеток или отдельных молекул ДНК);
  • многозадачность – за  один подход можно выявить сразу несколько разновидовых носителей информации (бактериологические методы на такое не способны, так как требуют разных питательных сред для каждого вида микроорганизмов);
  • возможность проведения точного количественного анализа;
  • скорость обработки (в отличие от других видов генетических исследований, ПЦР-диагностика занимает всего 5-7 часов);
  • точность результата (при соблюдении технологии ошибка практически исключена);
  • относительно низкая стоимость (анализ ПЦР не выходит за рамки средней цены на стандартные тесты).

Все эти преимущества позволяют использовать полимеразную цепную реакцию для регулярного контроля за процессом лечения.

Разработчик метода ПЦР-диагностики не зря получил Нобелевскую премию за свое «детище». Метод полимеразной цепной реакции позволяет:

  • определить штамм инфекционного агента при минимальном содержании в биоматериале (вплоть до единичных вирусных структур);
  • вычислить точную концентрацию возбудителя во всем организме (для определения оптимальной дозы лекарственных препаратов);
  • оценить степень патологического воздействия на пациента и выявить штаммы с высокой фармакологической устойчивостью;
  • установить последовательные этапы заражения и сделать дальнейший прогноз.

Это интересно! Возможности ПЦР-анализа намного шире количественно-качественной оценки инфекционного фона в организме человека. Помимо выявления инфекций, его используют для установления родства, определения личности, выявления генетических патологий, сравнения биоматериала в криминалистике.

Какие инфекции позволяет выявить ПЦР диагностика

Анализ ПЦР способен с высокой точностью вычислить любой инфекционный носитель, внесенный в современный медицинский каталог заболеваний:

  • возбудителей гепатита всех видов (ПЦР позволяет выявить источник инфекции на стадии инкубационного периода и начать лечение задолго до проявления симптомов заболевания);
  • патогены ВИЧ и ЗППП (уреаплазмы, микоплазмы, хламидии, трихомонады);
  • группу TORCH-инфекций (актуально при обследовании беременных для раннего выявления патологий плода);
  • туберкулез (латентная форма заболевания);
  • кандидоз (латентная форма);
  • энтеровирусную инфекцию;
  • мононуклеоз;
  • листериоз;
  • сальмонеллез (определение конкретного штамма);
  • папилломовирус;
  • гарднереллез;
  • вирус клещевого энцефалита.

Полимеразная цепная реакция: метод, цена, диагностика, проведение процедуры

Особенно большой популярностью пользуется анализ на внутриклеточные инфекции (например, хламидии), определение которых обычным путем затруднено даже при высокой концентрации этих микроорганизмов в тканях пациента.

Учитывая многозадачность метода, можно сделать одновременный ПЦР-анализ на 12 базовых инфекций. Комплексный подход — удобный выбор для планового скрининга организма на предмет половых инфекций с минимальным риском ошибочного диагноза.

На заметку! С помощью ПЦР-диагностики делают прогноз по так называемым «спящим» формам инфекций, которые находятся в организме, не проявляя себя симптомами болезни (особенно важно при лечении гинекологических и урологических заболеваний, туберкулеза, клещевого энцефалита, папилломавируса).

Какие биологические материалы исследуются

Установленных норм и границ не существует. Универсальность метода позволяет использовать для анализа любой биологический материал:

  • мазок из влагалища, соскоб из уретры и цервикального канала (для диагностики ЗППП);
  • моча (туберкулез, некоторые ЗППП, цитомегаловирус);
  • кровь (ВИЧ, гепатит, TORCH-инфекции);
  • мазок из горла (мононуклеоз, цитомегаловирус);
  • ликвор (нейроинфекции)
  • амниотическая жидкость и ткани плаценты (анализ на TORCH-инфекции для предотвращения патологий развития плода);
  • плевральная жидкость (легочные инфекции).

Для иных видов ПЦР-диагностики (установление родства, сравнение биоматериала) используют слюну, волосы, ногти, эпителиальные клетки и другие источники генетической информации.

На заметку! Методом ПЦР-диагностики выявляют возбудителей не только в составе живых тканей, но и в образцах почвы, воды, растительных субстратов; оценивают патогенную активность микроорганизмов как в организме человека, так и в окружающей его среде (наличие установленного источника заболевания позволит предпринять соответствующие меры для его предотвращения в будущем).

Как подготовиться к сдаче анализа

Пациентам нашей клиники нет необходимости задаваться вопросом, где сдать анализ на ПЦР. Мы обеспечиваем все условия для стерильного забора материала и отправки его в лабораторию.

Специальная подготовка не требуется, но перечень общих рекомендаций соблюдать желательно. За несколько дней откажитесь от алкоголя, ограничьте курение, по возможности, исключите лекарственные препараты, постарайтесь избегать стрессовых ситуаций и тяжелых физических нагрузок.

В остальном подготовка к сдаче анализа зависит от вида биоматериала:

  • перед забором мазка или соскоба на урогенитальные инфекции воздерживайтесь от половых актов в течение 2-3 дней (женщинам следует проследить, чтобы день сдачи анализа не выпал на дни месячных);
  • перед тем как сдать анализ крови на ПЦР, воздержитесь от утреннего приема пищи (анализ сдается натощак) и выпейте стакан чистой негазированной воды;
  • перед сдачей мочи воздержитесь от продуктов, влияющих на кислотность мочи (фрукты, мясо, бобовые, зелень).

Важно! Самое главное требование в ПЦР-диагностике инфекций – чистота биоматериала. Поэтому постарайтесь приложить все усилия, чтобы исключить загрязнение тканей чужеродной ДНК (позаботьтесь о стерильности транспортировочного контейнера, личной гигиене, наличии чистой одежды).

Расшифровка анализа ПЦР

Результаты качественного ПЦР анализа на инфекции выдаются в виде таблицы, где напротив каждого инфекционного агента стоит соответствующая отметка:

  • отрицательный результат (возбудитель данного вида отсутствует);
  • положительный результат (возбудитель обнаружен).

Отсутствие симптомов заболевания может не соответствовать реальной картине, поэтому для кого-то результаты анализа будут неожиданными. Огорчаться не стоит: выявление инфекционного агента на ранних стадиях – ключ к успешному и быстрому излечению.

При проведении количественного анализа ПЦР можно оценить степень вирусной нагрузки (узнать количество копий вируса на единицу объема). Благодаря этому виду исследования можно определить интенсивность протекания инфекционного процесса, а также оценить эффективность лечения.

Пцр анализ: цена и сроки

Среднее время проведения диагностики составляет 5-10 часов. Результаты в виде таблицы выдают уже на следующий рабочий день после забора биоматериала.

При выборе ПЦР-анализа цена не имеет кардинального значения. В среднем сумма затрат не выходит за рамки обычных биохимических тестов и, в отличие от основной массы генетических исследований, доступна всем пациентам.

Источник: https://www.polyclin.ru/uslugi/pcr-diagnostika/

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

В конце статьи см. словарь Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце. Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП). Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью. Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике — для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ — вирусов папилломы человека; в пульмонологии — для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии — для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов. Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Читайте также:  Кораксан: отзывы, цена, инструкция по применению, показания и противопоказания

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

  • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
  • два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
  • термостабильная ДНК-полимераза;
  • дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
  • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
  • буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции. Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий.

Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись.

Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C.

Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований.

После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО  в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

Словарь

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота — биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков.

РНК– рибонуклеиновая кислота — биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев — нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку.

РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка.

Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.

Нуклеоти́ды — основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп.

Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу.

Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию — адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) — гуанин, цитозиновый (C) — цитозин, тиминовый (Т) — тимин, урациловый (U) — урацил.

В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов — A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа — A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК — рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.

Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. 

Литература

  1. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9

Источник: https://www.invitro.ru/library/labdiagnostika/16110/

Анализы методом ПЦР

Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Таким образом, открытие этого метода — одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.

Пцр в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими).

Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР — самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей.

Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования).

Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .

Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса.

Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми.

Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.

Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя.

Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно.

Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции — один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

Пцр в диагностике вич-инфекции

В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

  1. Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
  2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
  3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
  4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).
Читайте также:  Лечение алкоголизма по методу геннадия шичко: суть, шаги, отзывы и эффективность

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.

2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализы ПЦР?

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

Источник: https://www.cmd-online.ru/analizy-i-tseny/polimeraznaja-cepnaja-reakcija-pcr/

Пцр (полимеразная цепная реакция). как производится пцр диагностика, показания, как подготовиться к исследованию, результат пцр :: polismed.com

Сайт предоставляет справочную информацию. Адекватная диагностика и лечение болезни возможны под наблюдением добросовестного врача. У любых препаратов есть противопоказания.

Необходима консультация специалиста, а также подробное изучение инструкции! Для адекватного и эффективного лечения многих инфекционных заболеваний необходимо своевременное установление точного диагноза. В решении этой задачи в наши дни привлекаются высокотехнологичные методы диагностики основанные на методах молекулярной биологии.

В настоящий момент  полимеразная цепная реакция (ПЦР) уже достаточно широко применяется в практической медицине как наиболее надежный инструмент лабораторной диагностики. Во-первых, данный метод используется для выявления возбудителей различных инфекционных заболеваний с высокой точностью. Во-вторых, для контроля эффективности проведенного лечения.

В различных руководствах, проспектах, статьях, а также объяснениях врачей-специалистов, мы часто сталкиваемся с употреблением непонятных терминов и слов. Действительно трудно рассказать о высокотехнологичных продуктах науки обыденными словами.

Каждый живой организм имеет свои уникальные гены. Гены располагаются в молекуле ДНК, которая собственно и является «визитной карточкой» каждого конкретного организма. ДНК (генетический материал) – это очень длинная молекула, которая состоит из «кирпичиков», называемых нуклеотидами. У каждого возбудителя инфекционных заболеваний они расположены строго специфично, то есть в определенной последовательности и комбинации. Когда необходимо понять имеется ли у человека тот или иной возбудитель, забирается биологический материал (кровь, моча, слюна, мазок), который содержит ДНК или фрагменты ДНК микроба. Но количество генетического материала возбудителя очень мало, и невозможно сказать какому именно микроорганизму он принадлежат. Для решения этой задачи и служит ПЦР. Суть полимеразной цепной реакции заключается в том, что берется малое количество материала для исследования, содержащего ДНК, а в процессе ПЦР происходит увеличение количества генетического материала, принадлежащего конкретному возбудителю и, таким образом, его можно идентифицировать. Идея метода ПЦР принадлежит американскому ученому K.Mullins, которую он предложил в 1983 году. Однако широкое клиническое применение получила лишь в средине 90-х годов XXвека. Разберемся с терминологией, что же это такое – ДНК и т.д. Каждая клетка любого живого существа (животного, растения, человека, бактерии, вируса) имеет хромосомы. Хромосомы – это хранители генетической информации, которые содержат всю последовательность генов каждого конкретного живого существа. Каждая хромосома состоит из двух нитей ДНК, закрученных в спираль друг относительно друга. ДНК – химически это дезоксирибонуклеиновая кислота, которая состоит из структурных компонентов – нуклеотидов. Нуклеотидов бывает 5 видов – тимин (Т), аденозин (А), гуанин (Г), цитозин (Ц) и урацил (У). Нуклеотиды располагаются друг за другом в строгой индивидуальной последовательности, образуя гены. Один ген может состоять из 20-200 таких нуклеотидов. Например, ген, кодирующий выработку инсулина, состоит из 60 пар нуклеотидов. Нуклеотиды имеют свойство комплементарности. Это означает что напротив аденина (А) в одной цепочке ДНК обязательно стоит тимин (Т) в другой цепочке, а напротив гуанина (Г) – цитозин (Ц). Схематически выглядит следующим образом:

  • Г — Ц Т — А
  • А — Т

Данное свойство комплементарности ключевое для проведения ПЦР.

         Молекулы ДНК и РНК могут «размножаться» (данное свойство используется для проведения ПЦР). Происходит это следующим образом: две нити ДНК или РНК, отходят друг от друга в стороны, на каждую нить садится специальный фермент, который синтезирует новую цепочку.

Синтез идет по принципу комплементарности, то есть, если в исходной цепочке ДНК стоит нуклеотид А, то во вновь синтезированной будет стоять Т, если Г – то Ц и т.д. Этот специальный фермент-«строитель» для начала синтеза нуждается в «затравке» — последовательности из 5-15 нуклеотидов.

Данная «затравка» определена для каждого гена (гена хламидии, микоплазмы, вирусов) экспериментально.

Итак, каждый цикл ПЦР состоит из трех стадий. В первую стадию происходит так называемое раскручивание ДНК – то есть разделение связанных между собой двух цепей ДНК. Во вторую — происходит присоединение «затравки» к участку нити ДНК.

И, наконец, удлинение данных нитей ДНК, которое производится ферментом-«строителем».

В настоящее время весь этот сложный процесс протекает в одной пробирке и состоит из повторяющихся циклов размножения определяемой ДНК с целью получения большого количества копий, которые могут быть, затем выявлены обычными методами. То есть из одной нити ДНК мы получаем сотни или тысячи.

В качестве пробы служит различный биологический материал: кровь и ее компоненты, моча, слюна, отделяемое слизистых оболочек, спинномозговая жидкость, отделяемое раневых поверхностей, содержимое полостей тела. Все биопробы собираются одноразовыми инструментами, а набранный материал заключают в пластиковые стерильные пробирки или помещают на культуральные среды, с последующей транспортировкой в лабораторию. В забранные пробы добавляют необходимые реагенты и ставят в программируемый термостат – термоциклер (амплификатор). В амплификаторе 30-50 раз повторяется цикл ПЦР, состоящий из трех этапов (денатурация, отжиг и удлинение). Что это означает? Рассмотрим подробнее. I этап ПЦР — Подготовка генетического материала для копирования. Происходит при температуре 95° С, при этом нити ДНК разъединяются, и на них могут садиться «затравки». «Затравки» изготавливают промышленным способом различные научно-производственные объединения, а лаборатории покупают уже готовые. При этом «затравка» для выявления, например, хламидии, работает только для хламидии и т.д. Таким образом, если тестируется биоматериал на наличие хламидийной инфекции, то в реакционную смесь помещается «затравка» для хламидий; если тестирование биоматериала на вирус Эпштейн-Барра, то и «затравка» для вируса Эпштейн-Барра.

II этап – Объединение генетического материала возбудителя инфекции и «затравки».

Если имеется ДНК определяемого вируса или бактерии, «затравка» садится на эту ДНК. Этот процесс присоединения «затравки» и есть второй этап ПЦР. Данная стадия проходит при температуре 75°С.

III этап — Копирование генетического материала возбудителя инфекции.

 Это процесс собственно удлинения или размножения генетического материала, который происходит при 72°С. К «затравкам» подходит фермент- «строитель» и синтезирует новую цепочку ДНК. С окончанием синтеза новой цепочки ДНК, заканчивается и цикл ПЦР. То есть за один цикл ПЦР происходит увеличение количества генетического материала в два раза. Например, в исходной пробе имелось 100 молекул ДНК какого-либо вируса, после первого цикла ПЦР в пробе будет уже 200 молекул ДНК тестируемого вируса. Один цикл длится 2-3 минуты.

 Для образования достаточного количества генетического материала для идентификации, обычно производится 30-50 циклов ПЦР, что занимает 2-3 часа.

Собственно ПЦР на этом заканчивается и далее идет не менее значимый этап идентификации. Для идентификации используют метод электрофореза или меченые «затравки». При использовании электрофореза полученные нити ДНК разделяются по размерам, и наличие фрагментов ДНК разной длины свидетельствует о положительном результате анализа (то есть о наличии того или иного вируса, бактерии и т.д.). При использовании меченых «затравок», к конечному продукту реакции добавляют хромоген (краситель), вследствие чего ферментативная реакция сопровождается образованием окраски. Развитие окраски прямо свидетельствует, что вирус или другой выявляемый агент присутствуют в исходной пробе.

На сегодняшний день, используя меченые «затравки», а также соответствующее программное обеспечение, можно производить сразу и «чтение» результатов ПЦР. Это так называемаяreal-time ПЦР.

Одним из существенных преимуществ метода ПЦР является высокая чувствительность – от 95 до 100%. Однако, эти преимущества должны базироваться на непременном соблюдении следующих условий:

  1. корректный забор, транспортировка биологического материала;
  2. наличие стерильного, одноразового инструментария, специальных лабораторий и обученного персонала;
  3. строгое соблюдение методики и стерильности во время проведения анализа

Чувствительность различается для различных выявляемых микробов. Так, например, чувствительность метода ПЦР для выявления вируса гепатита С составляет 97-98%, чувствительность для выявления уреаплазмы – 99-100%. Возможности, заложенные в ПЦР-анализе, позволяют достичь непревзойденной аналитической специфичности. Это означает выявление именно того микроорганизма, который искали, а не похожего или близкородственного. Диагностическая чувствительность и специфичность метода ПЦР, зачастую превосходят таковые и для культурального метода, называемого «золотым стандартом» для выявления инфекционных заболеваний. Учитывая продолжительность выращивания культуры (от нескольких дней до нескольких недель), преимущество метода ПЦР становится очевидным.  

ПЦР в диагностике инфекций

Преимущества метода ПЦР (чувствительность и специфичность) определяют широкий спектр применения в современной медицине. Основные области применения ПЦР-диагностики:

  1. диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний различной локализации
  2. контроль эффективности проведенной терапии
  3. уточнение вида возбудителя

ПЦР используется в акушерстве, гинекологии, неонатологии, педиатрии, урологии, венерологии, нефрологии, клинике инфекционных болезней, офтальмологии, неврологии, фтизиопульмонологии и др. Использование ПЦР-диагностики производится в совокупности с другими методами исследования (ИФА, ПИФ, РИФ и др.). Их сочетание и целесообразность определяет лечащий врач.

Возбудители инфекций, обнаруживаемые методом ПЦР

Вирусы:

  1. ретровирусы HIV-1 и HIV-2
  2. герпетиформные вирусы
  3. вирус простого герпеса 1 и 2 типов
  4. цитомегаловирус
  5. вирус Эпштейна-Барр
  6. варицелла – Зостер вирус
  7. герпес вирусы человека 6 и 7
  8. вирус гепатита С, В и А
  9. вирусы папилломы человека
  10. вирус краснухи
  11. аденовирусы
  12. риновирусы
  13. парвовирусы
  14. пикорновирусы

  Бактерии:

  1. микобактерии
  2. хламидии
  3. микоплазмы
  4. сальмонелла
  5. легионеллы
  6. клостридии
  7. бледная трепонема
  8. различные патогенные виды кишечной палочки
  9. холерный вибрион
  10. риккетсии
  11. золотистый стафилококк
  12.  бактериальный возбудитель менингита
  13. хеликобактер пилори
  14. уреаплазма
  15. возбудитель гонореи
  16. дифтерийная палочка
  17. гемофильная палочка

  В данном списке приведены наиболее распространенные инфекционные агенты, выявляемые методом ПЦР. На самом деле данный список гораздо шире, постоянно пополняется, так как синтезируются новые «затравки». Также следуют отметить, что список определяемых возбудителей определяется наличием «затравок» для идентификации в арсенале каждой конкретной лаборатории.

Наседкина А.К.  

Специальность: Врач офтальмолог

Источник: https://www.polismed.com/articles-pcr-polimeraznaja-cepnaja-reakcija-kak-proizvoditsja-pcr-diagnostika-pokazanija-kak-podgotovit-sja-k-issledovaniju-rezul-tat-pcr.html

Ссылка на основную публикацию